La plateforme d’Imagerie Cellulaire d’I-Stem comporte une section Imagerie Photonique, constituée d’un parc de 6 microscopes Zeiss, allant du microscope en champs clair le plus simple jusqu’au microscope Confocal à très haute résolution.
La diversité des équipements permet aux équipes de recherche d’avoir accès à différent degré de sophistication pour leurs acquisitions, en fonction de leurs besoins et des exigences de leurs études scientifiques.
Nature des échantillons analysables : Cellules vivantes ou fixées / coupes de Tissus
Traitements nécessaires : Sans traitement / Coloration / fluorescence
Supports compatibles : Lames / plaques/ flasques (selon le microscope considéré)
Types d’acquisitions disponibles : Ponctuelle / longues en atmosphère contrôlée (CO2/T°)
Natures des acquisitions disponibles : Champs large lumière blanche / DIC / Epifluorescence / spinning Disc/ Confocal
Stratégies d’acquisitions disponibles : Time series / Z stacks / Tile Scan / acquisitions multi-coordonnées / imagerie Spectrale / imagerie à très haute resolution (module airyscan)
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Lumière Blanche
Axioplan V2
Le microscope ZEISS Axioplan2 est un microscope droit en lumière blanche transmise. Il est équipé d’une caméra couleur CCD de 1.2MPixels, permettant l’acquisition d’images issues de cellules ou de coupes de tissus colorés sur lame.
Source lumineuse : Blanche
Support autorisé : Lames
Platine motorisée : non
Camera : Zeiss AxioCam MRc
Software : Axiovision release 4.8.1
Objectifs :
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Epifluorescence
Le site est équipé de deux microscopes inversés Zeiss Observer Z1, et d’un microscope droit Zeiss Imager Z1.
Pilotés par le logiciel Zeiss Zen Blue, tous ces microscopes permettent d’observer et d’acquérir des images de marquages fluorescents dans les longueurs d’ondes standards (DAPI, AF488, AF555 et AF647). Certains de ces microscopes offrent la possibilité d’accéder à d’autres longueurs d’ondes (voir la fiche de chaque microscope).
La diversité des objectifs à longueurs focales variées permet par ailleurs de travailler sur différents supports mince (lames/lamelles, plaques de culture à fond mince adaptées à l’Imagerie) ou plus épais (plaques ou flasques de culture cellulaire).
Zeiss « Z2 »
Les objectifs à courte distance focale et à fort grossissement de ce microscope le destine spécialement à l’observation d’échantillons sur lame ou de plaques à fond mince adaptées à l’Imagerie.
Support autorisé : Lames
Source lumineuse : HXP 120
Platine motorisée : En Z uniquement
Software : Zeiss Zen Blue
Camera : Zeiss AxioCam 506 Mono
Objectifs :
Filtres :
Zeiss « Z3 »
Ce microscope est équipe d’objectifs à longueur focale réglables, et est donc adapté à l’observation d’échantillons cellulaires dans des flasques ou des plaques de culture standard.
Support autorisé : Boites et flasques de culture, lames (par-dessous)
Source lumineuse : HXP 120
Platine motorisée : En Z uniquement
Software : Zeiss Zen Blue
Camera : Zeiss AxioCam 506 Mono
Objectifs :
Filtres :
Zeiss « Z1 »
Le site comporte également un microscope droit Zeiss Imager Z1, qui par sa configuration, ne permet que l’observation d’échantillons sur lame. Ce microscope possède une batterie d’objectifs et de filtres plus importantes que celles des autres microscopes à épifluorescence.
Source lumineuse : HBO 100
Support autorisé : Lames
Platine motorisée : En Z uniquement
Camera : Axiocam MRm
Software : Zeiss Zen Blue
Objectifs :
Filtres :
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Haute Résolution
Zeiss « Spinning Disc »
Le spinning Disc est un microscope inversé (sur une base de Zeiss Observer Z1) permettant de se rapprocher du pouvoir résolutif de la microscopie confocale tout en gardant l’avantage d’une acquisition video rapide.
https://www.zeiss.fr/microscopie/website/zeiss-campus/spinning-disk-microscopy.html
Source lumineuse épifluorescence : HXP 120V
Support autorisé : Lames/plaques/flasques de culture
Platine motorisée : X ;Y ;Z
Software : Metamorph
Modes d’acquisition:
• Epifluorescence ou Spinning Disc Mode
• Tile Scan
• Time Series (etude Live en atmosphere controlee)
• Positions
• Z Stacks
Grossissements :
Filtres :
Lasers :
Zeiss LSM-880
Le microscope Zeiss LSM880 est un microscope confocal developpé sur une base de microscope inversé Imager Z1.
La technologie Airyscan exploite un détecteur de zone à 32 canaux, chacun fonctionnant comme un pinhole très petit, qui permet de capter la totalité des taches de Airy. l’algorithme qui analyse les informations de ce détecteur permet ainsi d’obtenir un rendement lumineux très important. C’est à vous de décider si vous voulez utiliser ou non les informations supplémentaires issues de votre échantillon pour obtenir un rapport signal/bruit, une résolution ou une vitesse améliorés. Le mode Pinhole virtuel, en option, vous permet de décider même après l’acquisition la taille de pinhole la mieux adaptée à votre application.Par ailleurs, chacun des 32 canaux du détecteur fonctionnant comme un très petit pinhole, cette technologie permet d’accéder à une résolution améliorée d’un facteur X1.5 par rapport à une imagerie confocale conventionnelle. Vous disposez alors d’une résolution latérale de 140 nm et axiale de 400 nm, à 488 nm.
En mode spectral (demixing), le LSM 880 permet d’acquérir l’ensemble du spectre – et tous vos marqueurs – en un seul balayage avec 32 canaux, 512 x 512 pixels à 5 images par seconde.
https://www.zeiss.fr/microscopie/produits/confocal-microscopes/lsm-880.html#introduction
Source lumineuse épifluorescence : HXP 120
Support autorisé : Lames/plaques de cultures à fond mince/flasques de culture à fond mince
Platine motorisée : X ;Y ;Z
Software : Zeiss Zen Black
Modes d’acquisition:
• Imagerie confocale conventionnelle
• Imagerie Spectrale
• Tile Scan
• Time Series (etude Live en atmosphere controlee)
• Bleach/Fret/Frap
• Positions
• Z Stacks
• Airy Scan mode (Resolution X1.7/Imagerie Confocale conventionnelle)
Grossissements :
Filtres (mode Epifluorescence) :
Lasers :
