Imagerie à haut contenu

En construction

L’Analyse à Haut Contenu (High Content Screening; HCS) est une méthode d’analyse quantitative multifactorielle d’échantillons cellulaires, basée sur des acquisitions en imagerie microscopique automatisée.  Les bio-applications utilisées pour les analyses permettent d’obtenir simultanément un grand nombre de données quantitatives multiparamétriques relatives à des phénotypes cellulaires ciblés (morphologie, présence et/ou intensité de marquage, localisation intra-cellulaire,…). L’automatisation des acquisitions microscopiques autorise le criblage et l’analyse simultanée de nombreuses molécules, conditions ou lignées cellulaires à partir de plaques multipuits. Combinée à l’utilisation de bras robotisés pour  le chargement des plaques dans la machine, cette technique devient un outil d’analyse extrêmement puissant et complémentaire aux stratégies de High Throughput Screening pour le criblage de molécules pharmaceutiques.

Dans ce but, le pôle Imagerie à Haut Contenu de la plateforme Imagerie Cellulaire regroupe plusieurs imageurs possédant chacun des potentialités et des approches différentes.

Cellinsight CX7 / Arrayscan VTi (Thermofisher Scientific)

L’arrayscan VTi et le CX7 constituent deux versions de la même machine, qui fonctionnent en parallèle sur la plateforme, avec la même suite logicielle (HCS Studio). Deux licences d’analyse indépendantes des machines sont également disponibles sur la plateforme, pour la consultation et la réanalyse des résultats si nécessaire.

La technologie ayant évolué entre ces deux machines, quelques différences sont à noter au niveau des caractéristiques optiques et mécaniques des deux machines:

Bien qu’il ne soit pas possible d’en créer de nouvelle ,une vingtaines de bioapplications sont disponibles, et permettent de mettre en place des analyses de types Analyse Neuritiques, Cycle cellulaire, Colocalisation, détection d’aggregats, etc…

Le CX7 est associé à un bras robotisé Orbitor qui permet le chargement automatisé d’une douzaine de plaques dans la machine, ce qui rend cette machine compatible avec les études de criblages, et le travail en dehors des heures ouvrées.

ImageXpress (Molecular Devices)

Cet Imageur HCS se distingue des CX7/Arrayscan par la capacité de travailler en plus avec des cellules vivantes grâce à une enceinte thermostatée et en atmosphère contrôlée à 5% de CO2. Elle possède par ailleurs une tête de pipetage automatisée permettant par exemple la distribution de drogue dans un puit.

Le software MetaXpress, basé sur Metamorph, permet en outre d’utiliser des modules d’analyses assimilables à des Bioapplications préprogrammées, mais il est également possible de créer tout ou partie d’une bioapplication à l’aide du Custom Module Editor.

les caractéristiques optiques de la machine sont les suivantes

Deux stations d’analyses complètent le poste d’acquisition/analyse rattaché à la machine. Comme pour le CX7, l’imageXpress est équipé d’un bras robotisé pour la prise en charge automatisée de plusieurs plaques multipuits.

Incucyte Zoom et Incucyte S3 (Sartorius)

Le Zoom et le S3 sont deux versions du même imageur de chez Sartorius. Ces Incucytes, installés directement dans des incubateurs de culture, permettent de suivre et d’acquérir des images de cellules vivantes in situ, en fluorescence (vert ou rouge) ou en constraste de phase, sur de courtes périodes ou pendant plusieurs semaines, das un environnement optimal. Chacun de ces machine peut accueillir jusqu’à 6 plaques de cultures multi-puits.La fréquence d’acquisition des images est paramétrable par l’utilisateur.

Les photos peuvent être consultées et exportées depuis l’unité centrale rattachée à chaque incucyte. Selon la machine considérée, des modules d’analyses sont étalement disponibles pour effectuer des analyses quantitatives:

• de morphologie et confluence de la culture
• de migration cellulaire (Scratch Wound)
• de Chemotaxie
• d’analyse neuritique
• de taille de spheroide

Dernière modification : 01/08/2019