Biotechnologies des cellules souches

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Biotechnologies des cellules souches 


Equipe Cellule.

Equipe :

 
Yacine Laâbi : Responsable de laboratoire (CECS)
Johana Tournois : Ingénieur associé (CECS)
Julien Côme : Ingénieur associé (CECS)
Pascal Fragner: Chercheur associé (CECS)
Nelly Sigrist : Technicienne de recherche (CECS)
 
Les cellules souches embryonnaires humaines (hES) possèdent deux caractéristiques fondamentales : une capacité d'expansion illimitée et une capacité de pluripotence c’est-à-dire de se différencier vers tous les types cellulaires du corps humain. Les hES sont ainsi d'un intérêt considérable pour une utilisation en médecine régénérative et pour l'identification de nouvelles molécules pharmacologiques.
La plateforme « Biotechnologies des Cellules Souches » est une plateforme collaborative au sein d’I-STEM dont les programmes de recherche et de développement sont organisés autour de 4 pôles d’activités :

Conservation de lignées de cellules souches embryonnaires humaines
 

Les lignées hES importées de laboratoires étrangers académiques ou privés sont mises en banque dès réception. Lorsqu’une équipe de recherche souhaite utiliser une de ces lignées, elle est décongelée puis amplifiée à bas passage et soumise à des tests de contrôle de qualité très stricts qui permettent de vérifier l’intégrité des cellules, avant d’être congelée par vitrification en une trentaine de cryotubes et distribuée. L’ensemble de ce processus est informatisé à l’aide d’un logiciel dédié ce qui permet une tracabilité parfaite des échantillons requise par l’Agence de la Biomédecine.

Amplification et mise en banque de lignées porteuses de mutations à l’origine de maladies monogéniques


En collaboration avec le centre de dépistage préimplantatoire de Strasbourg, notre action consiste à construire une banque de cellules hES porteuses de mutations. Au CHU de Strasbourg, Philippe Tropel, sous la direction de S. Viville, dérive des lignées hES à partir d'embryons obtenus par fécondation in vitro. Ces embryons analysés par diagnostic pré-implantatoire sont porteurs de gènes mutants responsables de maladies monogéniques. Ces lignées sont établies à Strasbourg puis transferées à I-Stem où elles suivent le même processus que pour les lignées importées avant d’être cryopréservées puis mises en banque par notre équipe.
 
acquisition de nouvelles ressources biologiques
La création d'une large variété de lignées hES pour différentes maladies et différentes mutations, a pour but de permettre l'étude de la physiopathologie, des interactions phénotype/génotype et le développement de traitements pour ces pathologies et en parallèle, le criblage systématique de chimiothèques de composés à potentiel thérapeutique. De telles lignées cellulaires devraient fournir de nouveaux et puissants modèles pour l'étude des maladies monogéniques. En outre, ces lignées seront mises à la disposition de la communauté scientifique.
 

Contrôle qualité des lignées hES d'I-Stem

 
La mise en banque des lignées hES d’I-Stem est déterminée par la mise en œuvre d’un processus de contrôle qualité qui nous permet d’analyser:
 
- l’identité génétique des cellules amplifiées en amplifiant par PCR multiplex 8 loci STR
 
- leur stabilité génétique en vérifiant leur caryotype en bandes G et en M-FISH
 
- le maintien de leur état d’indifférenciation en analysant par cytométrie de flux l’expression de marqueurs phénotypiques tels SSEA-4 et TRA-1-81
 
- leur état sanitaire en particulier l’absence de contamination par des mycoplasmes
 
 
 

Nouveaux modèles de cellules souches pluripotentes humaines

 
Il est désormais possible d’obtenir des lignées de cellules souches pluripotentes non plus à partir d’embryons mais à partir de cellules humaines adultes par exemple des fibroblastes de peau. Ce processus appelé reprogrammation permet de dériver des lignées de cellules souches induites à la pluripotence (iPS) qui présentent toutes les caractéristiques des lignées hES. Notre programme de recherche vise à obtenir des lignées d’iPS à partir de fibroblastes de patients présentant des maladies monogéniques pour lesquelles il n’existe pas de modèle hES.
 
 
 

Pour en savoir plus.

Sites Web

Généralités du DPI
doccismef.chu-rouen.fr
Centre de Reproduction Bruxelles (K. Sermon)
www.vub.ac.be/english/index.php
Centre de DPI Strasbourg (S.Viville)
www-ulpmed.u-strasbg.fr/chimbio/DPI
Département de biologie du Développement (S. Viville)
www.igbmc.fr/recherche/Dep_BD/Eq_SVivi

Medias

INSERM/UEVE UMR 861, I-STEM, AFM: Genopole Campus 1, 5 rue Henri Desbruères, 91030 Evry cedex - France